要旨:

　　サイトカイニン遺伝子とオーキシン遺伝子を選抜マーカーとするMATベクターを構築し、効果を検討したので報告する。 　始めに、オーキシン・サイトカイニン遺伝子のみを有するコントロールベクターを構築し、サイトカイニン遺伝子のみのベクターと比較した。その結果、サイトカイニンにみのベクターに比較し、再分化効率・形質転換効率の上昇が、タバコ・ポプラにおいて確認された。 　次に、オーキシン・サイトカイニン遺伝子を有するMATベクターを用いて形質転換を行な った。タバコにおいて、20枚のリーフディスクから、12系統のGUS遺伝子の発現する多芽体が得られ、そのうち42％の多芽体からマーカーフリー個体が得られ、マーカーフリー個体の作成功率が向上することが示された。 　これらの結果から、オーキシン・サイトカイニン型MATベクターを用いることにより、効果的にマーカーフリー個体を作成するできることが示された。さらに、複数の植物種において、形質転換効率の上昇が示されたことから、MATベクターの応用可能な植物種を拡大できると考えられる。

Abstract:

・ Agrobacteriun mediated transformation is highly dependent upon competency of the target plant tissues. It is important to develop the capacity of transformed cells to include cell proliferation and differentiation. The system which results in cell proliferation and differentiation only to transformed cells, is highly desirable for plant transformation. It is reported that a new GST-MAT vector system (MATIMH), in which ipt gene combined with iaaM/H genes was used as the selectable marker gene and GST-II promoter was used as the promoter of the R gene in a site specific recombination system. In tobacco transformation, the combination of the ipt gene and the iaaM/H genes can result in production of both auxin and cytokinin in transformed tissues and induce regeneration of transgenic shoots exhibiting an ipt- shooty phenotype more efficiently than the ipt gene alone. When twenty tobacco leaf discs was transformed with the MATIMH vector, marker free transgenic plants were produced from five (41.6%) out of 12 ipt-shooty lines. These results indicated that the combination of the iaaM/H genes and the ipt gene can more efficiently produce both transgenic plants and marker free transgenic plants.